光吸收的本质当一束光照射到某物质或其溶液时，组成该物质的分子、原子或离子与光子发生“碰撞”，光子的能量就转移到分子、原子或离子上，是这些粒子由较低能态（基态）跃迁到较高能太（激发态），这个作用称为物质对光的吸收。被激发的粒子约在10-8s后回到基态，并以热或荧光等形式释放出能量。分子、原子或离子具有不连续的化能级，仅当照射光光子的能量hυ，与被照射物质粒子的基态和激发态能量之差相当时，才能发生吸收。不同物质微粒由于结构不同而具有不同的化能级，荧光分光光度计，其基态和激发态能量差也不相同。所以物质对光的吸收具有选择性。
分光光度计使用注意事项，该仪器应放在干燥的房间内，紫外分光度计，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。光度计的几点检验，稳定度的检验，在零点不受光的条件下，用零点调节器将仪器调至零点，观察3分钟读取透射比的变化，阜阳光度计，即，为零点稳定性。可见分光光度计，用来测量待测物质对可见光(400～760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器，称为可见分光光度计。可在600nm测定---细胞密度。
紫外可见分光光度计，紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光(200～760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定---和蛋白的浓度，也可以测定---细胞密度。光度计常见问题，紫外区读数漂移的原因，确认chuan灯是否点亮。chuan灯的使用时间是否超过了预期的500h寿命，一旦超过，光强减弱，也许需要更新。此外可检查夹缝宽度的设置是否太小。 分光光度计的关键参数有哪些，影响显色反应的主要因素，显色剂用量：通过实验来确定适用量。显色反应时间：显色反应的速度有快有慢。
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